Клітинна суспензія – це окремі клітини або клітинні агрегати, які вирощують у рідкому поживному середовищі в умовах постійної аерації. Основним способом отримання суспензійних культур є занурення шматочка калусу в рідке середовище, яке перемішується. Для ініціації суспензійної культури потрібно 2 – 3 г калусної тканини на 60 – 100 мл рідкого поживного середовища. Первинну суспензію отримують на шейкері, який має швидкість перемішування 100 – 120 об/хв.
Оптимальною для отримання високодиспергованої суспензійної культури є пухка, обводнена калусна тканина, вирощена на середовищі з 2,4 – Д, без іонів Са2+. Для вирощування клітинних суспензій використовують в основному ті ж поживні середовища, що і для калусних культур. Але є ряд середовищ, призначених безпосередньо для вирощування суспензійних культур.
Первинну суспензію перед субкультивуванням фільтрують через 1 – 2 шари марлі, нейлонові або металеві ситечка, щоб позбутися великих щільних грудок калусної тканини, залишків експланту або дуже крупних агрегатів. Як правило, тривалість пасажу при культивуванні клітинних суспензій становить 14 – 18 днів. Густина популяції за цей проміжок часу досягає 106 – 5х106 клітин на мл.
Ріст суспензійних культур можна оцінити за одним або кількома параметрами: 1) об’єм осаджених клітин (ООК); 2) число клітин; 3) сира і суха маса; 4) вміст білка і ДНК; 5) життєздатність клітин.
Для глибинного культивування рослинних клітин використовують відкриті або закриті системи в періодичному або проточному режимах – способи культивування розроблені в мікробіології. Суспензійні культури рослинних тканин широко використовують для отримання традиційних для рослин сполук вторинного синтезу: алкалоїдів, терпеноїдів, ефірних олій тощо.
Интересная информация для рыбаков. Ловля рыбы налим на Днепре. Ruboman.Ru
| |
Клітинна суспензія
Це цікаво:
