Мета роботи: набуття навичок по отриманню клітинних суспензій; отримати суспензійну культуру картоплі.
Матеріали та обладнання: калусна культура картоплі, вирощена на середовищі для калусу № 1 (табл.1); конічні колби на 250 мл з рідким (без агару) середовищем для калусу № 1 (100 мл середовища на колбу), стерильні чашки Перті, фольга, пінцети, скальпелі, спирт, спиртівка, ламінар – бокс, шейкер, стерильні лійки з нейлоновими фільтрами.
Хід роботи:
1. Перенести шматочки калусної тканини у стерильну чашку Петрі.
2. Стерильним пінцетом подрібнити калус на фрагменти.
3. Фрагменти калусної тканини помістити у конічні колби з рідким живильним середовищем (2 – 3 г/100 мл).
4. Колби з рослинним матеріалом культивувати у темряві на шейкері при 120 об/хв.
5. Через 10 – 14 днів середовище з клітинною суспензією профільтрувати через нейлон.
6. Фільтрат розділити на 3 порції, які розлити у стерильні конічні колби.
7. До клітинної суспензії додати свіже середовище, довести об’єм до 100 мл.
8. Колби з суспензійною культурою знову помістити на шейкер.
9.Субкультивування клітинної суспензії проводити кожні 14 – 18 днів. Для цього у ламінар – боксі із колби з клітинною суспензією забрати 50 – 60 мл (≈2/3 об’єму) середовища з клітинами і замінити свіжим середовищем того ж складу. Відібране середовище перенести у стерильну конічну колбу і свіжим середовищем довести об’єм до 100 мл.
